1. На главную
  2. Электронные версии
  3. Физиология растений
  4. T. 70, № 7, 2023

Физиология растений, 2023, T. 70, № 7, стр. 823-835

Хромато-масс-спектрометрический анализ гинзенозидов в морфогенных клеточных линиях женьшеня настоящего (Panax ginseng C.A. Meyer)

Т. Ю. Горпенченко a, *, В. П. Григорчук a, В. В. Маханьков b, Д. В. Кочкин c, d, Ю. В. Вологжанина a, М. Т. Ханды a, Г. К. Чернодед a, Ю. Н. Журавлев a

a Федеральное государственное бюджетное учреждение науки “Федеральный научный центр биоразнообразия наземной биоты Восточной Азии Дальневосточного отделения Российской академии наук”
Владивосток, Россия

b Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Тихоокеанский институт биоорганической химии им. Г.Б. Елякова Дальневосточного отделения Российской академии наук
Владивосток, Россия

c Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт физиологии растений имени К.А. Тимирязева Российской академии наук
Москва, Россия

d Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования “Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова”
Москва, Россия

* E-mail: gorpenchenko@biosoil.ru

Поступила в редакцию 04.10.2023
После доработки 31.10.2023
Принята к публикации 01.11.2023

Аннотация

Методом ВЭЖХ-МС определен состав тритерпеновых гликозидов в разных тканях клеточных линий (PgR ‒ ризогенная и PgG ‒ геммогенная) in vitro и корней интактных растений женьшеня настоящего (Panax ginseng C.A. Meyer), выращиваемых на плантациях в Приморском крае Российской Федерации. Обнаружено и охарактеризовано более 60 тритерпеновых гликозидов. Максимальное содержание гинзенозидов идентифицировано в листьях геммогенной линии. Общее количество гинзенозидов в эмбриональной ткани линии PgG было ниже, по сравнению со всеми другими исследованными образцами, в основном, за счет количества протопанаксадиолов. Во всех частях линии PgR содержание протопанаксатриола Re было в два раза выше, по сравнению с корнем интактного растения. В базальной части каллусов PgR и PgG обнаружено высокое содержание протопанаксатриолов и олеаноловых гинзенозидов. Таким образом, морфогенные клеточные линии повторяют не только паттерн качественного состава гинзенозидов, по сравнению с отдельными частями нативных корней и листьев, но и увеличивают их разнообразие и количество.

Ключевые слова: Panax ginseng, гинзенозиды, женьшень, культура клеток растений, морфогенная культура, тритерпеновые гликозиды

Список литературы

  1. Журавлев Ю.Н., Томских А.А., Горпенченко Т.Ю. История и перспективы генетических исследований женьшеня на Дальнем Востоке России // Вестник ДВО РАН. 2022. № 4. С. 101. https://doi.org/10.37102/0869-7698_2022_224_04_9

  2. Chen W., Balan P., Popovich B.G. Ginsenosides analysis of New Zealand-grown forest Panax ginseng by LC-QTOF-MS/MS // J. Ginseng Res. 2020. V. 44. P. 552. https://doi.org/10.1016/j.jgr.2019.04.007

  3. Yang Y., Ju Z., Yang Y., Zhang Y., Yang L., Wang Z. Phytochemical analysis of Panax species: a review // J. Ginseng Res. 2021. V. 45. P. 1. https://doi.org/10.1016/j.jgr.2019.12.009

  4. Du Z., Li J., Zhang X., Pei J., Huang L. An integrated LC-MS-based strategy for the quality assessment and discrimination of three Panax species // Molecules. 2018. V. 23. P. 2988. https://doi.org/10.3390/molecules23112988

  5. Li F., Lv C., Li Q., Wang J., Song D., Liu P., Zhang D., Lu J. Chemical and bioactive comparison of flowers of Panax ginseng Meyer, Panax quinquefolius L., and Panax notoginseng Burk // J. Ginseng Res. 2017. V. 41. P. 487. https://doi.org/10.1016/jjgr.2016.08.008

  6. Lee J.W., Choi B.-R., Kim Y.-C., Choi D.J., Lee Y.-S., Kim G.-S., Baek N.-I., Kim S.-Y., Lee D.Y. Comprehensive profiling and quantification of ginsenosides in the root, stem, leaf, and berry of Panax ginseng by UPLC-QTOF/MS // Molecules. 2017. V. 22 P. 2147. https://doi.org/10.3390/molecules22122147

  7. Lee J., Han H., Yuan X., Park E., Lee J., Kim J.H. A rapid, simultaneous and quantitative analysis of 26 ginsenosides in white and red Panax ginseng using LC-M-S/MS // Appl. Biol. Chem. 2021. V. 64:13. https://doi.org/10.1186/s13765-020-00588-w

  8. Di P., Yan Y., Wang P., Yan M., Wang Y.-P., Huang L.-Q. Integrative SMRT sequencing and ginsenoside profiling analysis provide insights into the biosynthesis of ginsenoside in Panax quinquefolium // Chin. J. Nat. Med. 2022. V. 20. P. 614. https://doi.org/10.1016/S1875-5364(22)60198-5

  9. Gantait S., Mitra M., Chen J.-T. Biotechnological interventions for ginsenosides production // Biomolecules. 2020. V. 10. P. 538. https://doi.org/10.3390/biom10040538

  10. Xu F., Valappil A.K., Mathiyalagan R., Tran T.N.A., Ramadhania Z.M., Awais M., Yang D.C. In vitro cultivation and ginsenosides accumulation in Panax ginseng: a review // Plants. 2023. V. 12. P. 3165. https://doi.org/10.3390/ plants12173165

  11. Nosov A.M., Popova E.V., Kochkin D.V. Isoprenoid production via plant cell cultures: biosynthesis, accumulation and scaling-up to bioreactors // Production of biomass and bioactive compounds using bioreactor technology / Ed. Paek K.Y., Murthy H., Zhong J.J. Dordrecht: Springer-Verlag. 2014. P. 563. https://doi.org/10.1007/978-94-017-9223-3_23

  12. Atanasov A.G., Waltenberger B., Pferschy-Wenzig E.M., Linder T., Wawrosch C., Uhrin P., Stuppner H. Discovery and resupply of pharmacologically active plant-derived natural products: a review // Biotechnol. Adv. 2015. V. 33. P. 1582. https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2015.08.001

  13. Nakonechnaya O.V., Gafitskaya I.V., Grigorchuk V.P., Gorpenchenko T.Y., Bezdelev A.B., Zhuravlev Y.N. Polyphenol composition of Dracocephalum charkeviczii Prob. plants in in situ and in vitro conditions // Russ. J. Plant Physiol. 2022. V. 69:27. https://doi.org/10.1134/S1021443722010149

  14. Kochkin D.V., Galishev B.A., Glagoleva E.S., Titova M.V., Nosov A.M. Rare triterpene glycoside of ginseng (ginsenoside malonyl-Rg 1) detected in plant cell suspension culture of Panax japonicus var. repens // Russ. J. Plant Physiol. 2017. V. 64. P. 649. https://doi.org/10.1134/S102144371705003X

  15. Glagoleva E.S., Konstantinova S.V., Kochkin D.V., Ossipov V., Titova M.V., Popova E.V., Nosov A.M., Paek K.Y. Predominance of oleanane-type ginsenoside R0 and malonyl esters of protopanaxadiol-type ginsenosides in the 20-year-old suspension cell culture of Panax japonicus C.A. Meyer // Ind. Crops Prod. 2022. V. 177 P. 552114417 https://doi.org/10.1016/j.indcrop.2021.114417

  16. Wu J., Zhong J.-J. Production of ginseng and its bioactive components in plant cell culture: Current technological and applied aspects // J. Biotechnol. 1999. V. 68. P. 89. https://doi.org/10.1016/s0168-1656(98)00195-3

  17. Kochkin D.V., Glagoleva E.S., Galischev B.A., Spiridovich E.V., Nosov A.M., Reshetnikov V.N. Analysis of gynzenosides in the roots of Panax ginseng introduced in the central botanical garden of NAS of Belarus // Doklady of the National Academy of Sciences of Belarus. 2018. V. 62. P. 447. https://doi.org/10.29235/1561-8323-2018-62-4-447-454

  18. Балеев Д.Н., Осипов В.И., Савин П.С., Байкова Ю.П., Сидельников Н.И. Сравнительный анализ состава и содержания гинзенозидов в каллусной культуре клеток и корне женьшеня обыкновенного, Panax ginseng // Биотехнология. 2022. Т. 38. № 2. С. 57. https://doi.org/10.56304/S0234275822020028

  19. Song X., Wu H., Piao X., Yin Z., Yin Ch. Microbial transformation of ginsenosides extracted from Panax ginseng adventitious roots in an airlift bioreactor // Electron. J. Biotechnol. 2017. V. 26. P. 20. https://doi.org/10.1016/j.ejbt.2016.12.005

  20. Журавлев Ю.Н., Гетманова Е.С., Музарок Т.И., Булгаков В.П. Способ микроразмножения женьшеня. Патент SU1824114A1, 1993.

  21. Murashige T., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bioassays with Tobacco tissue cultures // Physiol. Plant. 1962. V. 15. P. 473. https://doi.org/10.1111/j.1399-3054.1962.tb08052.x

  22. Жинкина Н.А., Воронова О.Н. К методике окраски эмбриологических препаратов // Ботанический журнал. 2000. Т. 85. С. 168.

  23. Gorpenchenko T.Y., Kiselev K.V., Bulgakov V.P., Tchernoded G.K., Bragina E.A., Khodakovskaya M.V., Koren O.G., Batygina T.B., Zhuravlev Y.N. The Agrobacterium rhizogenes rolC-gene-induced somatic embryogenesis and shoot organogenesis in Panax ginseng transformed calluses // Planta. 2006. V. 223. P. 457. https://doi.org/10.1007/s00425-005-0102-2

  24. Уварова Н.И., Маханьков В.В., Малиновская Г.В., Самошина Н.Ф., Атопкина Л.Н., Лихацкая Г.Н., Ким Н.Ю., Анисимов М.М., Еляков Г.Б. Химическая характеристика, сравнительное количественное определение и биологическая активность тритерпеновых гликозидов из дикого и плантационного женьшеня Panax ginseng C.A. Meyer, произрастающих в Приморском крае // Химико-фармацевтический журнал. 2000. Т. 34. С. 19.

  25. Маханьков В.В., Бурундукова О.Л., Музарок Т.И., Уварова Н.И., Журавлев Ю.Н. Содержание гинзенозидов в листьях Panax ginseng C.A. Meyer в зависимости от возраста и условий произрастания // Растительные ресурсы. 2007. Т. 3. С. 107.

  26. Chen Y., Zhao Z., Chen H., Yi T., Qin M., Liang Z. Chemical differentiation and quality evaluation of commercial asian and american ginsengs based on a UHPLC–QTOF/MS/MS metabolomics approach // Phytochem. Anal. 2015. V. 26 P. 145. https://doi.org/10.1002/pca.2546

  27. Qiu S., Yang W.Z., Shi X.J., Yao C.L., Yang M., Liu X., Jiang B.-H., Wu W.-Y., Guo D.A. A green protocol for efficient discovery of novel natural compounds: characterization of new ginsenosides from the stems and leaves of Panax ginseng as a case study // Anal. Chim. Acta. 2015. V. 893 P. 65. https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.08.048

  28. Wang H.P., Zhang Y.B., Yang X.W., Zhao D.Q., Wang Y.P. Rapid characterization of ginsenosides in the roots and rhizomes of Panax ginseng by UPLC-DAD-QTOF-MS/MS and simultaneous determination of 19 ginsenosides by HPLC-ESI-MS // J. Ginseng Res. 2016. V. 40 P. 382. https://doi.org/10.1016/j.jgr.2015.12.001

  29. Minh Duc N., Thoi Nham N., Kasai R., Ito A., Yamasaki K., Tanaka O. Saponins from Vietnamese ginseng, Panax vietnamensis HA et GRUSHV. Collected in Central Vietnam. I. // Chem. Pharm. Bull. 1993. V. 41. P. 2010. https://doi.org/10.1248/cpb.41.2010

  30. Dictionary of food compounds additives, flavors, and ingredient / Ed. Sh. Yannai. 2004. A CRC ress Company Boca Raton, London, New York, Washington, D.C. 1782 p.

  31. Van Le T.H., Lee G.J., Vu H.K.L., Kwon S.W., Nguyen N.K., Park J.H., Nguyen M.D. Ginseng saponins in different parts of Panax vietnamensis // Chem. Pharm. Bull. 2015. V. 63 P. 950. https://doi.org/10.1248/cpb.c15-00369

  32. Peng M., Zhang T., Ding Y., Yi Y., Yang Y., Le J. Structure-based prediction of CAD response factors 1 of dammarane-type tetracyclic triterpenoid saponins and its application to the analysis of saponin contents in raw and processed Panax notoginseng // RSC Adv. 2016. V. 6. P. 36987. https://doi.org/10.1039/C6RA03193E

  33. Wang H.-P., Wang Z.-J., Du J., Lin Z.-Z., Zhao C., Zhang R., Yin Q., Fan C.-L., Peng P., Wang Z.-B. Comprehensive identification of ginsenosides in the roots and rhizomes of Panax ginseng based on their molecular features-oriented precursor ions selection and targeted MS/MS analysis // Molecules. 2023. V. 28. P. 941. https://doi.org/10.3390/molecules28030941

  34. Oh J.Y., Kim Y.J., Jang M.G., Joo S.C., Kwon W.S., Kim S.Y., Jung S.-K., Yang D.C. Investigation of ginsenosides in different tissues after elicitor treatment in Panax ginseng // J. Ginseng Res. 2014. V. 38. P. 270. https://doi.org/10.1016/j.jgr.2014.04.004

  35. Rahimi S., Kim Y.J., Yang D.C. Production of ginseng saponins: elicitation strategy and signal transductions // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2015. V. 99. P. 6987.

  36. Chopra P., Chhillar H., Kim Y.J., Jo I.H., Kim S.T., Gupta R. Phytochemistry of ginsenosides: recent advancements and emerging roles // Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 2023. V. 63. P. 613. https://doi.org/10.1080/10408398.2021.1952159

  37. Moses T., Papadopoulou K.K., Osbourn A. Metabolic and functional diversity of saponins, biosynthetic intermediates and semi-synthetic derivatives // Crit. Rev. Biochem. Mol. Biol. 2014. V. 40. P. 439. https://doi.org/10.3109/10409238.2014.953628

  38. Fehér A. Callus, dedifferentiation, totipotency, somatic embryogenesis: what these terms mean in the era of molecular plant biology? // Front. Plant Sci. 2019. V. 10: 536. https://doi.org/10.3389/fpls.2019.00536

  39. Yang Y., Ju Z., Yang Y., Zhang Y., Yang L., Wang Z. Phytochemical analysis of Panax species: a review // J. Ginseng Res. 2021. V. 45. P. 1. https://doi.org/10.1016/j.jgr.2019.12.009

  40. Yao C.L., Pan H.Q., Wang H., Yao S., Yang W.Z., Hou J.J., Jin Q.H., Wu W.Y., Guo D.A. Global profiling combined with predicted metabolites screening for discovery of natural compounds: characterization of ginsenosides in the leaves of Panax notoginseng as a case study // J. Chromatogr. 2018. V. 1538. P. 34. https://doi.org/10.1016/j.chroma.2018.01.040

Дополнительные материалы

скачать ESM.zip
Приложение 1.
Рис. 1. МС и МС2 спектры соединений с молекулярной формулой C42H72O14 обнаруженных в исследуемых экстрактах
Рис. 2. МС и МС2 спектры соединений с молекулярной формулой C48H82O18 обнаруженных в исследуемых экстрактах
Рис. 3. МС и МС2 спектры соединений с молекулярной формулой C51H84O21 обнаруженных в исследуемых экстрактах
Рис. 4. МС и МС2 спектры соединений, идентифицированных как гликозиды олеаноловой кислоты и обнаруженных в исследуемых экстрактах
Таблица 1. Список основных тритерпеновых гликозидов, идентифицированных в неочищенных экстрактах нативных плантационных корней и морфогенных клеточных культур женьшеня PgR и PgO методом ВЭЖХ-МС/МС2

Инструменты

следующая статья выпуска предыдущая статья выпуска содержание выпуска

Физиология растений

Архивы выпусков Информация о журнале Отправить рукопись в журнал