1. На главную
  2. Электронные версии
  3. Журнал аналитической химии
  4. T. 77, № 8, 2022

Журнал аналитической химии, 2022, T. 77, № 8, стр. 748-754

Кинетические и аналитические характеристики реакции пероксидазного окисления трифенил-4-сульфоната натрия

С. А. Пиденко a, И. С. Москвичева a, Н. А. Бурмистрова a, *

a Саратовский государственный университет им. Н.Г. Чернышевского, Институт химии
410012 Саратов, ул. Астраханская, 83, Россия

* E-mail: naburmistrova@mail.ru

Поступила в редакцию 21.07.2021
После доработки 17.09.2021
Принята к публикации 18.09.2021

Полный текст (PDF)

Аннотация

Изучена возможность ферментативного окисления сульфопроизводных ди- и триариламинов пероксидом водорода в присутствии пероксидазы хрена (ПХ). Показано, что продукт ферментативного окисления трифениламин-4-сульфоната натрия (ТФАС) является более устойчивым по сравнению с дифениламин-4-сульфонатом натрия. Исследовано влияние различных факторов (природы буферных растворов, концентраций реагентов, а также присутствия в реакционной среде катионных комплексов Ir(IV) и Rh(III)) на скорость окисления ТФАС. Изучены кинетические закономерности реакции ферментативного окисления ТФАС и оценены кинетические параметры (kкат, Km), сделано предположение о механизме активации процесса в присутствии каталитически активных комплексов Ir(IV) и Rh(III). Показана возможность аналитического применения реакции ферментативного окисления ТФАС для определения ПХ (5.0 × 10–2 нМ), пероксида водорода (0.6 мМ) и катионных комплексов Ir(IV) (5 нМ) и Rh(III) (60 нМ).

Ключевые слова ариламины, трифениламин-4-сульфонат натрия, ферментативное окисление, пероксидаза хрена, пероксид водорода, кинетические закономерности.

Ферментативные методы анализа, основанные на измерении скорости химических реакций, катализируемых ферментами, − широко распространенный инструмент аналитической химии [1, 2]. Это обусловлено рядом преимуществ ферментативных реакций, включая высокую скорость, специфичность, возможность проведения в водных растворах. Накопленные к настоящему времени теоретические знания и практический опыт работы, возможность подбора компонентов и условий проведения ферментативных реакций с учетом поставленной задачи лежат в основе их применения при определении широкого круга неорганических и органических веществ в объектах окружающей среды, медицине, пищевой и фармацевтической промышленности, при контроле микробиологических и биохимических процессов.

Особое место среди ферментов занимает пероксидаза из корней хрена (ПХ). Высокая каталитическая активность и стабильность ПХ, ее субстратная специфичность лежат в основе широкого применения фермента в различных форматах био- и иммунохимического анализа, а также в качестве распознающего элемента при разработке биосенсоров [3–6]. Уникальная структура ПХ, которая является гликопротеидом, состоящим из полипептидной цепи, формирующей двухдоменную глобулу, и гемовой простетической группы с атомом железа между доменами, определяет возможность прямого взаимодействия фермента с ароматическими донорными молекулами [6–8]. Измерение оптического сигнала методами фотометрического, хемилюминесцентного, флуоресцентного анализа при изучении взаимодействий ароматических соединений с ПХ широко используется для определения активности ПХ, а также при определении широкого круга субстратов и эффекторов фермента [4, 9–14].

Среди хромогенных субстратов ПХ определенного внимания заслуживают ароматические амины, для которых характерно образование ярко окрашенных продуктов ферментативного окисления, что дает возможность проводить прямое определение активности ПХ. Наиболее известными представителями хромогенных субстратов этого класса соединений являются коммерчески доступные 3,3',5,5'-тетраметилбензидин (TMБ) и 3,3'-диаминобензидин, а также о-дианизидин, о‑фенилендиамин, о-толуидин. Использование реакций на их основе позволяет реализовать высокочувствительные методики определения ПХ, однако возможность неспецифического окисления субстратов в присутствии различных окислителей существенно ограничивает область их применения [15]. В плане расширения возможностей спектрофотометрического определения ПХ перспективными являются реакции окисления производных ди- и триариламинов, которые характеризуются более высокой специфичностью по сравнению с первичными ароматическими аминами. При этом продукты окисления третичных ариламинов характеризуются большей устойчивостью и высокими коэффициентами молярного поглощения по сравнению с первичными и вторичными ариламинами. Ранее нами показана [16] перспективность применения реакции окисления трифениламин-4-сульфоната натрия (ТФАС), включенного в состав полимерной пленки полиуретана, пероксидом водорода для определения ПХ. Однако детального изучения реакции окисления ТФАС в растворе и кинетических закономерностей процесса не проводили.

Цель данной работы состояла в изучении кинетических закономерностей реакции ферментативного окисления ТФАС в присутствии ПХ и оценке их аналитических возможностей.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Материалы и методы. В работе использовали трифениламин (ТФА) (Sigma-Aldrich, 98%), дифениламин-4-сульфонат натрия (ДФАС, Россия, ч.д.а.), ПХ (Sigma, ~150 усл. ед./мг), 2,2–азино-бис(3-этилбензтиазолин-6)-сульфоновую кислоту (АБТС, Sigma), ТМБ (Sigma), пероксид водорода (х.ч.), RhCl3 (Merck, 98%), H2IrCl6 ⋅ хН2О (Merck). Все остальные реагенты, использованные в работе, были квалификации не ниже х.ч

Трифениламин-4-сульфонат натрия синтезировали методом прямого сульфирования ТФА серной кислотой (ρ = 1.8 г/мл) [17].

Стандартные растворы ДФАС и ТФАС (5.0 × × 10–3 М), ПХ (1 мг/мл, ~23 мкМ) готовили растворением точной навески, Н2О2 (1.0 × 10–2 М) – разбавлением аликвоты в бидистиллированной воде. Рабочие растворы реагентов готовили разбавлением стандартных растворов непосредственно перед применением. Стандартные растворы H2IrCl6 и RhCl3 (1 мг/мл) готовили растворением точной навески в НСl (1 М). Каталитически активные формы Ir(IV) (1.0 × 10–5 М) и Rh(III) (5.0 × 10–5 М) готовили 3-кратной термообработкой аликвоты стандартных растворов с НСlO4 (конц., 2 мл) до образования влажных солей и переводили в раствор H2SO4 (1.0 × 10–3 М). Приготовленные растворы сохраняли каталитическую активность в течение трех месяцев.

Спектры поглощения растворов регистрировали на спектрофотометре UV-1800 Spectrophotometer (SHIMADZU, Япония) с разрешением 1 нм. Скорость реакции определяли при 680 нм (молярный коэффициент поглощения продукта 6.7 × 104 М–1 см–1 [9]).

рH растворов измеряли pH-метром pH-150МИ (Измерительная техника, Москва, Россия) с применением комбинированного электрода ЭСК-10603/7.

Методика определения пероксидазы хрена. Реакцию окисления ТФАС пероксидом водорода в присутствии ПХ проводили по следующей методике. В стеклянную пробирку вводили последовательно рассчитанное количество Н2О (суммарный объем – 5 мл), 0.5 мл H2SO4 (1.0 × 10–3 M), ТФАС (0.3 мл, 1.0 × 10–3 М), ПХ (5–300 мкл, 60 нМ), Н2О2 (0.5 мл, 1.0 × 10–2 М), Ir(IV) (25 мкл, 1.0 × 10–5 М)/Rh(III) (25 мкл, 5.0 × 10–4 М) при комнатной температуре. Начало реакции соответствовало добавлению пероксида водорода. Для построения градуировочной зависимости оптическую плотность при 680 нм регистрировали через 110 с после начала реакции.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Реакция ферментативного окисления дифениламин-4-сульфоната натрия и трифениламин-4-сульфоната натрия пероксидом водорода. ДФАС и ТФАС не окисляются Н2О2 в широком диапазоне кислотности среды, в то же время добавление ПХ приводит к появлению ярко окрашенных форм в слабокислых растворах H2SO4 (рН 2.5–4.5). Следует отметить довольно высокую кислотность среды изучаемой реакции, которая не является оптимальной для каталитического действия ПХ. Однако депротонирование окисленных форм ТФАС приводит к исчезновению окраски в растворах с меньшей кислотностью.

Важно отметить высокую устойчивость ТФАС к окислителям в слабокислой среде. При рН > 1 реагент не окисляется целым рядом окислителей (NH4VO3, NaNO2, KBrO3, KIO3, NaIO4, FeCl3) как в отсутствие, так и в присутствии ПХ.

Продукты ферментативного окисления ДФАС характеризуется полосами поглощения при 430 и 540 нм (рис. 1), соответствующими сульфопроизводным катион-радикала (ДФБ•+) и дикатиона (ДФБ2+) дифенилбензидина. С течением времени наблюдается исчезновение длинноволновой полосы поглощения и полное исчезновение окраски раствора. Спектр поглощения окисленной формы ТФАС характеризуется высокоинтенсивной полосой при 680 нм, соответствующей образованию сульфоната дикатиона тетрафенилбензидина (ТФБ2+), а также низкоинтенсивной полосой ~970 нм. Яркая окраска раствора сохраняется в течение 5–10 мин, устойчивость ТФБ2+ зависит от условий протекания реакции. Трансформация спектра − снижение интенсивности при 680 нм, появление новой полосы при 480 нм и увеличение интенсивности при 970 нм − позволяет предположить протекание побочных реакций, приводящих к образованию бесцветного сульфоната катион-радикала тетрафенилбензидина ТФБ•+. Последовательное образование ряда окисленных форм ТФАС хорошо согласуется с известными закономерностями окисления ариламинов.

Рис. 1.

Спектры поглощения дифениламин-4-сульфоната натрия (ДФАС) и трифениламин-4-сульфоната натрия (ТФАС) при их окислении пероксидом водорода в присутствии пероксидазы хрена (ПХ): ДФАС/ТФАС − 6.0 × × 10–5 М, ПХ – 3.0 × 10–9 М, H2O2 − 5.0 × 10–3 М, H2SO4 −1.0 × 10–3 М, t = 40 с.

Таким образом, ТФАС можно рассматривать как альтернативный субстрат для ПХ, устойчивый к действию широкого круга окислителей. При этом реакция окисления ТФАС пероксидом водорода в присутствии ПХ позволяет получить аналитический сигнал в длинноволновой области спектра с высоким молярным коэффициентом поглощения. Однако применение этой реакции в аналитических целях требует поиска условий стабилизации продукта окисления ТФАС. В связи с этим изучено влияние различных факторов на скорость реакции окисления ТФАС.

Влияние условий на реакцию окисления трифениламин-4-сульфоната натрия пероксидом водорода в присутствии пероксидазы хрена. Порядок смешивания реагентов несущественно влияет на интенсивность и устойчивость аналитического сигнала, однако наиболее воспроизводимые результаты получали при смешивании растворов в следующей последовательности: реагент, ПХ, окислитель. Установлено, что состав буферного раствора существенно влияет на скорость окисления ТФАС в присутствии ПХ. Реакция практически не протекает в цитратно-фосфатном (0.01 М, рН 4) буферном растворе, скорость реакции низкая в ацетатном (0.01 М, рН 4–5) и НСl–глицин (рН 4) буферных растворах. Сильное влияние природы буферного раствора на скорость ферментативного окисления ТФАС, вероятно, обусловлено поляризующим действием анионов на устойчивость интермедиатов и продуктов окисления ТФАС.

Наиболее интенсивную окраску продукта окисления ТФАС и относительно устойчивые во времени продукты окисления наблюдали в слабокислых растворах серной кислоты. Использование H2SO4 позволяет проводить измерения при постоянных значениях рН (±0.1) для серии растворов с постоянными концентрациями ТФАС и пероксида водорода. Следует отметить, что H2SO4 является оптимальной средой и для реакции каталитического окисления ТФАС периодат-ионами [17, 18].

Показано, что интенсивность сигнала и устойчивость иона ТФБ2+ максимальны при концентрации H2SO4 5.0 × 10–5−2.0 × 10–4 М (рис. 2а), концентрацию H2SO4 1.0 × 10–4 М выбрали в качестве оптимальной и использовали в дальнейшей работе.

Рис. 2.

Влияние концентрации H2SO4 (а) и H2O2 (б) на оптическую плотность продукта окисления трифениламин-4-сульфоната натрия (ТФАС) при 680 нм: ТФАС − 0.18 мМ, пероксидаза хрена − 3.6нМ (а) и 1.2нМ (б), Н2О2 −1.0.мМ (а), H2SO4 −0.1 мМ (б), t − 60 с (а) и 100 с (б). Кинетические кривые реакции ферментативного окисления ТФАС при различной концентрации ТФАС (в); в отсутствие (1) и в присутствии каталитически активных форм Ir(IV) (0.2мкМ, 2) и Rh(III) (0.5.мкМ, 3) (г): ТФАС – 0.18 мМ, ПХ − 1.8нМ, Н2О2 − 1.0 мМ, H2SO4 − 0.1 мМ.

Зависимость аналитического сигнала от концентрации H2O2 имеет вид кривой с насыщением, которая достигает максимума при концентрации 5.0 × 10–4 М (рис. 2б), использование концентрации окислителя 1.0 × 10–3 М позволяет получить более стабильный аналитический сигнал. Таким образом, реакция окисления ТФАС протекает при более высоких концентрациях окислителя по сравнению с другими ариламинами.

Увеличение концентрации ТФАС в диапазоне (0.3−1.8) × 10–4 М позволяет получить аналитический сигнал, который стабильно увеличивается в течение 10 мин и зависит от концентрации ПХ (рис. 2в). Скорость реакции линейно зависит от концентрации реагента при фиксированной концентрации ПХ.

При выбранных концентрациях (Н2О2 − 1.0 × × 10–3 М, ТФАС − 1.8 × 10–4 М, H2SO4 − 1.0 × 10–4 М) интенсивность полосы поглощения ТФБ2+ линейно зависит от концентрации ПХ до 5.0 нМ, что позволяет использовать реагент для количественного определения активности фермента. Определение ПХ при выбранных условиях характеризуется высокой воспроизводимостью результатов (n = 3, sr ≤ 5%). При более высоких концентрациях ПХ увеличиваются скорости как целевой реакции, так и побочных процессов, что приводит к снижению воспроизводимости результатов определения ПХ.

Ранее окислительно-восстановительные свойства ТФАС подробно изучали Муштакова с сотр. [17, 18]; показана возможность окисления реагента периодат-ионами в присутствии каталитически активных форм металлов платиновой группы в слабокислых средах. С другой стороны, известным фактом является возможность влияния переходных металлов на реакции окисления органических субстратов в присутствии ПХ [12]. Эти данные послужили предпосылкой для изучения влияния ионов переходных металлов на скорость реакции пероксидазного окисления ТФАС пероксидом водорода. Установлено, что использование каталитически активных катионных форм Ir(IV) и Rh(III) позволяет существенно увеличить (до 60%) чувствительность реакции ТФАС (рис. 2г), а также стабильность и воспроизводимость системы. Для установления возможных причин стабилизации ТФБ2+ каталитически активными формами Ir(IV) и Rh(III) изучены кинетические закономерности протекания реакции окисления ТФАС пероксидом водорода в присутствии ПХ.

Кинетические закономерности реакции ферментативного окисления трифениламин-4-сульфоната натрия. Для расчета кинетических характеристик реакции использовали модель Михаэлиса−Ментен. Зависимость начальной скорости реакции (v0) от концентрации ТФАС в двойных обратных координатах при различных концентрациях Ir(IV) и Rh(III) показана на рис. 3.

Рис. 3.

Зависимость ν0 от концентрации трифениламин-4-сульфоната натрия в двойных обратных координатах в отсутствие (1) и в присутствии (2–4) каталитически активных форм (а) Ir(IV) (2 − 0.05, 3 − 0.10, 4 − 0.20 мкМ) и (б) Rh(III) (2 − 0.50, 3 − 5.0 мкМ): ПХ − (а) 1.2нМ и (б) 1.8нМ, Н2О2 − 1.0 мМ, H2SO4 − 0.1мМ.

Полученные зависимости использовали для расчета кинетических параметров процесса − “числа оборотов” (kкат) и константы Михаэллиса (Km) согласно эмпирическим уравнениям (1) и (2), которые отражают зависимость констант от концентрации каталитически активной формы Ir(IV)/Rh(III) [19]:

(1)
$k_{{{\text{кат}}}}^{{\text{a}}} = {{k}_{{{\text{кат}}}}}\left( {1{\text{ }} + \alpha {{{\left[ A \right]}}_{0}}} \right),{\text{ }}{{{\text{c}}}^{{ - 1}}},$
(2)
$K{{_{{{\text{кат}}}}^{{\text{а}}}}_{{}}} = {{K}_{{\text{m}}}}\left( {1{\text{ }} + \alpha {{{\left[ A \right]}}_{0}}} \right),{\text{ M}}.$

Значения kкат и Km, а также νmax определяли на основании анализа зависимостей ν0 от [ТФАС] в двойных обратных координатах, с последующим расчетом коэффициента (степени) активации α, характеризующего увеличение кинетического параметра в присутствии 1 моль/л активатора.

Полученные значения кинетических параметров (табл. 1) хорошо согласуются с данными [20]. Значения коэффициента активации (α) свидетельствуют об увеличении количества циклов пероксидазного окисления ТФАС в присутствии Ir(IV) и Rh(III) (из расчета на 1 моль/л активатора) и, вероятно, связаны с возможностью увеличения эффективности протекания лимитирующей стадии процесса – образования промежуточного продукта окисления катион-радикала ТФАС•+:

${{{\text{Н}}}_{{\text{2}}}}{{{\text{О}}}_{{\text{2}}}} + {\text{ПХ}} \to {{{\text{Н}}}_{{\text{2}}}}{\text{О + П}}{{{\text{Х}}}_{{{\text{Ох}}}}}{\text{,}}$
${\text{П}}{{{\text{Х}}}_{{{\text{Ох}}}}}{\text{ + ТФАС}} \leftrightarrow {\text{ТФА}}{{{\text{С}}}^{{{{ \bullet + }}}}} + {\text{ПХ,}}$
$\begin{gathered} {\text{П}}{{{\text{Х}}}_{{{\text{Ох}}}}}\,\,{\text{ + Ir}}\left( {{\text{IV}}} \right){\text{/Rh}}\left( {{\text{III}}} \right) \leftrightarrow \\ \leftrightarrow \,\,{\text{ПХ}}\,\,{\text{ + Ir}}\left( {{\text{IV}}} \right){\text{*/Rh}}\left( {{\text{III}}} \right){\text{*,}} \\ \end{gathered} $
$\begin{gathered} {\text{ТФАС + Ir}}\left( {{\text{IV}}} \right){\text{*/Rh}}\left( {{\text{III}}} \right){\text{*}} \leftrightarrow \hfill \\ \leftrightarrow \,\,{\text{ТФА}}{{{\text{С}}}^{{{{ \bullet + }}}}}{\text{ + Ir}}\left( {{\text{IV}}} \right){\text{/Rh}}\,\left( {{\text{III}}} \right){\text{.}} \hfill \\ \end{gathered} $
Таблица 1.

Кинетические характеристики пероксидазного окисления трифениламин-4-сульфоната натрия при 20°С при различных концентрациях каталитически активных форм Ir(IV) и Rh(III)

Концентрация катализатора, мкМ Vmax × 10–5, М/c Km × 10–4, M kcat × 104, с–1 α (kcat) × 10–4, М–1 α (Km) × 10–4, М–1
ПХ − 1.2нМ, Н2О2 − 1.0мМ, H2SO4 − 0.1 мМ, катализатор − иридий
0 0.005 0.1 0.4 – –
0.05 0.008 0.2 0.7 1.2 1.1
0.10 0.070 0.8 5.7 12.3 12.7
0.20 0.157 1.8 13.3 15.0 15.0
ПХ – 1.8 нМ, Н2О2 − 1.0мМ, H2SO4 − 0.1 мМ, катализатор – родий
0 0.012 0.1 1.0 – –
0.50 0.100 0.9 8.5 15.0 13.0
5.0 0.187 1.0 15.8 3.0 3.0

Аналитическое применение реакции окисления трифениламин-4-сульфоната натрия пероксидом водорода. Относительно высокая стабильность ТФБ2+ в присутствии каталитически активных форм Ir(IV) и Rh(III) и наличие линейных участков зависимостей аналитического сигнала от концентраций ПХ, Н2О2, а также каталитически активных форм Ir(IV) и Rh(III) дает возможность применять данную реакцию для различных целей. Аналитические характеристики методик на основе реакции окисления ТФАС пероксидом водорода представлены в табл. 2.

Таблица 2.

Аналитические характеристики методик на основе реакции окисления трифениламин-4-сульфоната натрия пероксидом водорода в присутствии пероксидазы хрена (сТФАС = 0.18 мМ, ${{c}_{{{{{\text{H}}}_{{\text{2}}}}{{{\text{O}}}_{{\text{2}}}}}}}$ = 1.0мМ, сIr(IV) = 0.05 мкМ, ${{c}_{{{{{\text{H}}}_{{\text{2}}}}{\text{S}}{{{\text{O}}}_{{\text{4}}}}}}}$ = 0.1 мМ, t = 110 с)

Характеристика ПХ, нМ H2O2, мМ* Ir(IV), нМ* Rh(III), мкM**
Диапазон определяемых концентраций (предел обнаружения) 0.1–5.0 (5.0 × 10–2) 1.0–3.0 (0.6) 20–60 (5.0) 0.25–2.5 (6.0 × 10–2)
Уравнение линейной регрессии (R2) А = 0.41сПХ + 0.02 (0.994) А = 1.7${{c}_{{{{{\text{H}}}_{{\text{2}}}}{{{\text{O}}}_{{\text{2}}}}}}}$ + 0.02 (0.991) А = 0.28сIr + 0.05 (0.990) А = 0.13сRh + 0.35 (0.990)

*  сПХ = 1.2 нМ, ** сПХ = 1.8 нМ.

Сравнили аналитические характеристики определения ПХ с использованием реакций окисления ТФАС и коммерчески доступных АБТС и ТМБ. Реакции пероксидазного окисления АБТС и ТМБ (0.1 мМ) проводили в Na-ацетатном буферном растворе (0.1 М, рН 5.0), начало реакции инициировали добавлением раствора пероксида водорода (0.1 мМ). Полученные данные показывают, что аналитические характеристики предложенной нами методики в выбранных условиях лишь незначительно уступают характеристикам методики окисления АБТС (5.0 × 10–3–5.0нМ, предел обнаружения 1.0 × 10–3 нМ) и сопоставимы с таковыми для методики окисления ТМБ (5.0 × × 10–2–5.0.нМ, предел обнаружения 2.0 × 10–2 нМ). Кроме того, субстрат ТФАС устойчив к действию окислителей различной природы.

* * *

Таким образом, показана возможность использования ТФАС в качестве альтернативного субстрата ПХ для различных областей применения. ТФАС соответствует требованиям, предъявляемым к субстратам для ферментативных методов анализа, а именно имеет определенный состав продукта окисления, характеризуется высоким молярным коэффициентом поглощения в длинноволновой области спектра, хорошо растворим в водных растворах [21]. В то же время существенным отличием ТФАС является его устойчивость в присутствии широкого круга окислителей.

Впервые изучены кинетические закономерности пероксидазного окисления ТФАС пероксидом водорода в присутствии каталитически активных форм Ir(IV) и Rh(III), которые позволили объяснить их активирующее влияние и предположить механизм реакции.

Список литературы

  1. Проблемы аналитической химии. Т. 12. Биохимические методы анализа / Под ред. Дзантиева Б.Б. М.: Наука, 2010. 392 с.

  2. Шеховцова Т.Н., Мугинова С.В., Веселова И.А. Ферментативные методы анализа: новые подходы и области применения // Известия АН. Сер. хим. 2007. № 4. С. 583.

  3. Ngo T.T. Peroxidase in chemical and biochemical analysis // Anal. Lett. 2010. V. 43. № 10–11. P. 1572.

  4. Веселова И.А., Шеховцова Т.Н. Оптические сенсорные системы на основе полиэлектролитного комплекса пероксидазы с хитозаном для определения биологически активных веществ // Журн. аналит. химии. 2019. Т. 74. № 1. С. 48.

  5. Григоренко В.Г., Андреева И.П., Рубцова М.Ю., Егоров А.М. Рекомбинантная пероксидаза хрена: получение и использование в аналитических целях (обзор) // Биохимия. 2015. Т. 80. № 4. С. 480.

  6. Преснова Г.В., Рубцова М.Ю., Егоров А.М. Электрохимические биосенсоры на основе пероксидазы хрена // Рос. хим. журн. 2008. Т. 52. № 2. С. 60.

  7. Захарова Г.С., Упоров И.В., Тишков В.И. Пероксидаза из корней хрена: модулирование свойств химической модификацией белковой глобулы и гема // Успехи биол. химии. 2011. Т. 51. С. 37.

  8. Azevedo A.M., Martins V.C., Prazeres D.M., Vojinovic V., Cabral J.M., Fonseca L.P. Horseradish peroxidase: A valuable tool in biotechnology // Biotechnol. Annu. Rev. 2003. V. 9. № 3. P. 1387.

  9. Родионов П.В., Алиева Е.А., Сергеева Е.А., Веселова И.А., Шеховцова Т.Н. Определение пероксида водорода и органических пероксидов в мицеллярных и водно-органических средах с использованием спектрофотометрического биосенсора на основе пероксидазы из корней хрена // Журн. аналит. химии. 2016. Т. 71. № 9. С. 971.

  10. Veselova I.A., Malinina L.I., Rodionov P.V., Shekhovtsova T.N. Properties and analytical applications of the self-assembled complex {peroxidase-chitosan} // Talanta. 2012. V. 102. P. 101.

  11. Poliakov A.E., Dumshakova A.V., Muginova S.V., Shekhovtsova T.N. A peroxidase-based method for the determination of dopamine, adrenaline, and α-methyldopa in the presence of thyroid hormones in pharmaceutical forms // Talanta. 2011. V. 84. № 3. P. 710.

  12. Мугинова С.В., Веселова И.А., Парова Л.М., Шеховцова Т.Н. Ферментативное определение кадмия, цинка и свинца в растительных объектах // Журн. аналит. химии. 2008. Т. 63. № 10. С. 1103.

  13. Zhang Z., Lai J., Wu K., Huang X., Guo S., Zhang L., Liu J. Peroxidase-catalyzed chemiluminescence system and its application in immunoassay // Talanta. 2018. V. 180. P. 260.

  14. Fornera S., Walde P. Spectrophotometric quantification of horseradish peroxidase with o-phenylenediamine // Anal. Biochem. 2010. V. 407. № 2. P. 293.

  15. Метелица Д.И. Карасёва Е.И. Инициирование и ингибирование свободнорадикальных процессов в биохимических пероксидазных системах (обзор) // Прикладная биохимия и биомедицина. 2007. Т. 43. № 5. С. 537.

  16. Зубарева И.С., Колонтаева О.А., Чернозубова Е.В., Бурмистрова Н.А. Сенсорные микропланшеты для определения пероксидазы хрена на основе реакции окисления трифениламин-4-сульфокислоты пероксидом водорода // Изв. Сарат. ун-та. Нов. сер. Сер: Химия. Биология. Экология. 2017. Т. 17. № 1. С. 10.

  17. Никоноров П.Г., Муштакова С.П., Бурмистрова Н.А., Кожина Л.Ф. Каталиметрическое определение родия на основе реакции окисления трифениламин-4-сульфокислоты периодатом натрия // Журн. аналит. химии. 2004. Т. 59. № 2. С. 161.

  18. Никоноров П.Г., Бурмистрова Н.А., Муштакова С.П. Трифениламин-4-сульфокислота в каталиметрическом определении платиновых металлов // Журн. аналит. химии. 2008. Т. 63. № 4. С. 432.

  19. Наумчик И.В., Карасева Е.И., Метелица Д.И., Едимечева И.П. Ингибирование пероксидазного окисления 3,3',5,5' – тетраметилбензидина аминофенолами // Биохимия. 2005. Т. 70. С. 397.

  20. Карасева Е.И., Гапоник П.Н., Метелица Д.И. Влияние тетразола и его аминопроизводных на кинетику пероксидазного окисления хромогенных субстаратов // Журн. биоорган. химии. 2004. Т. 30. № 3. С. 316.

  21. Shivakumar A. Role of peroxidase in clinical assays: A short review // J. Clin. Nutr. Diet. 2017. V. 3. № 2. P. 1.

Дополнительные материалы отсутствуют.

Инструменты

следующая статья выпуска предыдущая статья выпуска содержание выпуска

Журнал аналитической химии

Архивы выпусков Информация о журнале Отправить рукопись в журнал