Прикладная биохимия и микробиология, 2023, T. 59, № 3, стр. 289-294

Оптимизация параметров биобаллистической трансформации Nicotiana tabacum

А. А. Давлекамова 1, А. В. Зубрицкий 1, Т. А. Тимофеева 1*, И. В. Яковлева 1, А. М. Камионская 1

1 Институт биоинженерии им. К.Г. Скрябина, Федеральный исследовательский центр “Фундаментальные основы биотехнологии” Российской академии наук
117312 Москва, Россия

* E-mail: timofeeva.bio@gmail.com

Поступила в редакцию 15.12.2022
После доработки 09.01.2023
Принята к публикации 10.01.2023

Аннотация

Биобаллистическая трансформация – один из рабочих методов доставки нуклеиновых кислот в растительные клетки. В статье был проведен подбор параметров для работы с генной пушкой “PDS-1000/He Hepta System”. В качестве объекта исследований использовали модельное растение Nicotiana tabacum. Маркерным геном служил ген GFP (Green Fluorescent Protein). Были определены оптимальные параметры для трансформации клеток листьев N. tabacum: давление разрыва мембраны 1350 psi; размер частиц вольфрама 1.3 мкм; метод очистки плазмидной ДНК – переосаждение этанолом. Полученные результаты будут полезны для разработки протоколов биобаллистической трансформации растительных клеток, включая применение для редактирования генома сельскохозяйственных растений.

Ключевые слова: биобаллистика, Nicotiana tabacum, трансформация, GFP, PDS-1000/He

Список литературы

  1. Sanford J.C. // Trends Biotechnol. 1988. V. 6. P. 299–302. https://doi.org/10.1016/0167-7799(88)90023-6

  2. Hansen G., Wright M.S. // Trends Plant Sci. 1999. V. 4. P. 226–231. https://doi.org/10.1016/S1360-1385(99)01412-0

  3. Jain R.K., Jain S., Wang B., Wu R. // Plant Cell Rep. 1996. V. 15. № 12. P. 963–968. https://doi.org/10.1007/BF00231597

  4. Sparks C.A., Jones H.D. // Meth. in Mol. Biol. 2009. V. 478. P. 71–92. https://doi.org/10.1007/978-1-59745-379-0_4

  5. Ismagul A., Yang N., Maltseva E., Iskakova G. // Plant Biol. 2018 V. 18. P. 135–143. https://doi.org/10.1186/s12870-018-1326-1

  6. Zhang J., Du H., Chao M., Yin Z., Yang H., Li Y., Huang F., Yu D. // Front. Plant Sci. 2016. V. 7. P. 628.https://doi.org/10.3389/fpls.2016.00628

  7. Аукенов Н.Е., Масабаева М.Р., Хасанова У.У. // Наука и Здравоохранение. 2014. № 1. С. 51–53.

  8. Gordon-Kamm W.J., Spencer T.M., Mangano M.L., Adams T.R. // The Plant Cell. 1990. V. 2. P. 603–618. https://doi.org/10.1105/tpc.2.7.603

  9. Sanford J.C., Smith F.D., Russell J.A. Meth. in Enzymol. 1993. V. 217. P. 483–509. https://doi.org/10.1016/0076-6879(93)17086-K

  10. Chee M.J.Y., Lycett G.W., Chin C.F. // Electronic J. Biotechnol. 2018. V. 34. 51–58. https://doi.org/10.1016/j.ejbt.2018.05.005

Дополнительные материалы отсутствуют.