Химическая физика, 2023, T. 42, № 6, стр. 3-20

Конденсация ДНК в бактериях

Ю. Ф. Крупянский 1*, А. А. Генералова 1, В. В. Коваленко 1, Н. Г. Лойко 12, Э. В. Терешкин 1, А. В. Моисеенко 13, К. Б. Терешкина 1, О. С. Соколова 3, А. Н. Попов 4

1 Федеральный исследовательский центр химической физики им. Н.Н. Семёнова Российской академии наук
Москва, Россия

2 Федеральный исследовательский центр “Фундаментальные основы биотехнологии” Российской академии наук
Москва, Россия

3 Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова
Москва, Россия

4 European Synchrotron Radiation Facility
71, avenue des Martyrs, CS 40220, 38043 Grenoble Cedex 9, France

* E-mail: yufk@chph.ras.ru

Поступила в редакцию 11.01.2023
После доработки 18.01.2023
Принята к публикации 20.01.2023

Аннотация

Дезоксирибонуклеиновая кислота (ДНК) организована в нуклеоиде активно растущей клетки иерархически – с тремя уровнями компактизации ДНК. Нижний уровень (малый масштаб ≥1 Кбайт пар оснований) обеспечивается взаимодействием со связанными с ДНК белками. Активно растущие клетки поддерживают динамический, далекий от равновесия порядок благодаря метаболизму. При переходе клеток в покоящееся состояние (практически полное отсутствие метаболизма) обычные биохимические способы защиты ДНК перестают работать, и клетки, адаптируясь к новым условиям, вынуждены использовать физические механизмы защиты ДНК. Проведено изучение структуры ДНК в нуклеоиде покоящихся клеток, образующихся при стрессе голодания, с помощью методов дифракции синхротронного излучения и просвечивающей электронной микроскопии (ПЭМ). Экспериментальные результаты позволили визуализировать структуры нижнего иерархического уровня компактизации ДНК в нуклеоиде покоящихся клеток. Впервые проведенная серия дифракционных экспериментов свидетельствует о наличии периодической упорядоченной организации ДНК во всех изученных бактериях. Метод ПЭМ позволил извлечь тонкую визуальную информацию о типе конденсации ДНК в нуклеоиде бактерии Escherichia coli (E. coli). Обнаружены внутриклеточные нанокристаллические, жидкокристаллические и свернутые нуклеосомоподобные структуры ДНК. Свернутая нуклеосомоподобная структура наблюдалась впервые, она является результатом множественного сворачивания длинных молекул ДНК вокруг связывающего ДНК белка голодающих клеток (Dps) и его ассоциатов. Обнаруженные нами различные типы конденсированного состояния ДНК в изучаемых покоящихся клетках E. сoli (гетерогенность конденсации ДНК) дают дополнительные аргументы в пользу концепции, рассматривающей микробную популяцию как многоклеточный организм. Проведено изучение изменений в архитектуре ДНК под влиянием химического аналога аутоиндуктора анабиоза 4-гексилрезорцина (4-ГР). Рост концентрации 4-ГР индуцирует переход части клеток популяции в анабиотическое покоящееся состояние, а затем – и в мумифицированное состояние. Проведенные исследования структуры ДНК в анабиотическом и мумифицированном состояниях показывают спектроскопическую идентичность структуры ДНК в покоящемся анабиотическом состоянии и в покоящемся состоянии, образующемся при стрессе голодания. Исследования структуры ДНК в мумифицированном состоянии показывают сильное отличие последней от структуры ДНК в анабиотическом состоянии.

Ключевые слова: дезоксирибонуклеиновая кислота, бактерия Escherichia coli, стресс голодания, внутриклеточные структуры – нанокристаллическая, жидкокристаллическая, свернутая нуклеосомоподобная, аутоиндуктор анабиоза, 4-гексилрезорцин, анабиотическое и мумифицированное состояния.

Список литературы

  1. Stonington O.G., Pettijohn D.E. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1971. V. 68. № 1. P. 6

  2. Verma S.C., Qian Z., Adhya S.L. // PLoS. Genet. 2019. V. 15. № 12. e1008456

  3. Trun N., Marko J. // Amer. Soc Microbiol. News. 1998. V. 64. № 5. P. 276.

  4. Бухарин О.В., Гинцбург А.Л., Романова Ю.М., Эль-Регистан Г.И. Механизмы выживания бактерий. М.: Медицина, 2005.

  5. Ткаченко А.Г. Молекулярные механизмы стрессорных ответов у микроорганизмов. Екатеринбург: Уро РАН, 2012.

  6. Minsky A., Shimoni E., Frenkiel-Krispin D. // Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 2002. V. 3. P. 50.

  7. Grosberg A.Y., Khokhlov A.R. Statistical physics of macromolecules. N.Y.: AIP, 1994.

  8. Bloomfield V.A. // Curr. Opin. Struct. Biol. 1996. V. 6. P. 334.

  9. Циммер К. Микрокосм. E. coli и новая наука о жизни. Пер. с англ. М.: ООО “Альпина нон-фикшн”, 2013.

  10. Крупянский Ю.Ф., Гольданский В.И. // УФН. 2002. Т. 172. № 11. С. 1247.

  11. Крупянский Ю.Ф. // Хим. физика. 2021. Т. 40. № 3. С. 60; https://doi.org/10.31857/S0207401X21030079

  12. Шайтан К.В. // Хим. физика. 2023. Т. 42. № 6. С. 40.

  13. Dekker J., Rippe K., Dekker M., Kleckner N. // Capturing Chromosome Conform. Sci. 2002. V. 295. P. 1306; https://doi.org/10.1126/science.1067799

  14. Simonis M., Klous P., Splinter E. et al. // Nat. Genet. 2006. V. 38. P. 1348; https://doi.org/10.1038/ng1896

  15. Dostie J., Richmond T.A., Arnaout R.A. et al. // Genome Res. 2006. V. 16. P. 1299; https://doi.org/10.1101/gr.5571506

  16. Gennes P.G.D. Scaling concepts in polymer physics. Ithaca: Cornell University Press, 1979.

  17. Grosberg A.Y., Nechaev S.K., Shakhnovich E.I. // J. Phys. 1988. V. 49. P. 2095.

  18. Lieberman-Aiden E., Van Berkum N.L., Williams L. et al. // Science. 2009. V. 326. P. 289.

  19. Mirny L.A. // Chromosome Res. 2011. V. 19. P. 37.

  20. Яшина Е.Г., Григорьев С.В. // ЖЭТФ. 2019. Т. 156. Вып. 3. С. 540.

  21. Zwietering M.H., Jongenburger I., Rombouts F.M., van’t Riet K. // Appl. Environ. Microbiol. 1990. V. 56. № 6. P. 1875.

  22. Loiko N., Danilova Y., Moiseenko A. et al. // PLOS One. 2020. V. 15. № 10; https://doi.org/10.1371/journal.pone.0231562

  23. Шрёдингер Э. Что такое жизнь с точки зрения физики? М.: РИМИС, 2009.

  24. Moiseenko A., Loiko N., Sokolova O.S., Krupyanskii Y.F. // Methods in Molecular Biology. 2022. V. 2516. P. 143; https://doi.org/10.1007/978-1-0716-2413-5_9

  25. Синицын Д.О., Лойко Н.Г., Гуларян С.К. и др. // Хим. физика. 2017. Т. 36. № 9. С. 59.

  26. Крупянский Ю.Ф., Лойко Н.Г., Синицын Д.О. и др. // Кристаллография. 2018. Т. 63. № 4. С. 572.

  27. Reich Z., Wachtel E., Minsky A. // Science. 1994. V. 264. № 5164. P. 1460.

  28. Frenkiel-Krispin D., Ben-Avraham I., Englander J. et al. // Mol. Microbiol. 2004. V. 51. P. 395.

  29. Kovalenko V., Popov A., Santoni G. et al. // Acta Cryst. 2020. V. F76. P. 568.

  30. Moiseenko A., Loiko N., Tereshkina K. et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2019. V. 517. № 3. P. 463.

  31. Tereshkin E., Tereshkina K., Loiko N. et al. // J. Biomol. Struct. Dyn. 2019. V. 37. P. 2600.

  32. Терешкин Э.В., Терешкина К.Б., Коваленко В.В. и др. // Хим. физика. 2019. Т. 38. № 10. С. 48.

  33. Tereshkin E.V., Tereshkina K.B., Krupyanskii Y.F. // J. Physics: Conf. Ser. 2021. V. 2056. № 1. P. 012016.

  34. Blinov V.N., Golo V.L., Krupyanskii Y. // Nanostuctures. Math. Phys. Model. 2015. V. 12. P. 5.

  35. Vasilevskaya V.V., Khokhlov A.R., Kidoaki S., Yoshikawa K. // Biopolymers. 1997. V. 41. P. 51.

  36. Loiko N., Danilova Y., Moiseenko A. et al. // bioRxiv. 2020. P. 2020.03.27.011494; https://doi.org/10.1101/2020.03.27.011494

  37. Shapiro J.A. // Scientific American. 1988. V. 258. № 6. P. 82.

  38. Shapiro J.A., Dworkin M. // Quarterly Rev. Biol. 1998. V. 73. № 3. P. 352.

  39. Сузина Н.Е., Мулюкин А.Л., Лойко Н.Г. и др. // Микробиология. 2001. Т. 70. № 5. С. 776.

  40. Procopio A., Malucelli E., Pacureanu A. et al. // ACS Central Science. 2019. V. 5. P. 1449.

  41. Santos S., Yang Y., Rosa M. et al. // Scientific Reports. 2019. V. 9. P. 17217.

  42. Ou H.D., Phan S., Deerinck T.J. et al. // Science. 2017. V. 357. № 6349. eaag0025; https://doi.org/10.1126/science.aag0025

Дополнительные материалы отсутствуют.